液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因?
1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子。
3、可能柱超载,减少进样量。
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法是什么?
1、样品量不足,解决办法为增加样品量
2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4、检测器衰减太多。调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数
6、检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡。解决办法为排气。
8、记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。
9、流动相流量不合适。调整流速即可。
10、检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
怎样解决做HPLC分析时,柱压不稳定,原因何在?
1、泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理;
2、比例阀失效,更换比例阀即可;
3、泵密封垫损坏,更换密封垫即可;
4、溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;
5、系统检漏,找出漏点,密封即可;
6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
出现峰展宽的原因?
1、样品体积过大——用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%。
2、在进样阀中造成峰扩展——进样前后排出气泡以降低扩散。
3、数据系统采样速率太慢——设定速率应是每峰大于10点。
4、检测器时间常数过大——设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%。
5、流动相粘度过高——增加柱温,采用低粘度流动相。
6、检测池体积过大——用小体积池,卸下热交换器。
7、保留时间过长——等度洗脱时增加强溶剂含量,也可用梯度洗脱。
8、柱外体积过大——将连接管径和连接管长度降至最小。
9、样品过载——进小浓度小体积样品。
简单判断比例阀是否内漏?
设定泵使用一个单独通路(A),打开Purge阀,流速5mL/min,提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面,观察这些通路(B、C、D)内的溶剂是否随着流动,正常时均不应流动。
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