气相色谱的定量分析内标法
内标法是一种间接或相对的气相色谱校准方法。在气相色谱分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。
气相色谱定量分析时选择内标法:
范围:当样品的所有组分不能全部流出色谱柱时,或检测器不能对每个组分都产生信号,或者只需要测定样品中某几个组分含量时,可采用内标法。
选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。
内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。
气相色谱用内标法选择内标物有以下6个要求:
(1)内标物应是该试样中不存在的纯物质;
(2)必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;
(3)加入内标物的量应接近于被测组分;
(4)色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。
(5)内标物与被分析物质的物理化学性质要相似(如:沸点、极性、化学结构等)
(6)选择合适的内标物加入量,使得内标物和被分析物质二者峰面积的匹配性大于75%,以免由于它们处在不同响应值区域而导致的灵敏度偏差。
气相色谱中内标法的优缺点:
内标法的优点:测定的结果较为准确,定量准确,精度最高,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。对操作条件要求不高,内标法只要求待测组分出峰或完全分离即可,其余组分则可用快速升高柱温使其流出或用反吹法将其放空,缩短了分析时间。
内标法的缺点:操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。
内标是定量的一种方法,做不同的分析,面对着不同的要求,再加上分析、成本分析效率等等问题,简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。
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