二手液质联用API LC-MS/MS
串联质谱及液质联用技术结合了色谱、质谱两者的优点,将色谱的高分离性能和质谱的高鉴别特点相结合,组成了较完美的现代分析技术,近年来在生物医学、药学、环境检测、毒物分析等领域发挥了巨大作用。且随着现代化高新技术的不断发展及二手液质联用API LC-MS/MS液相色谱-质谱联用技术自身的优点,液相色谱-质谱联用技术必将在未来几年不断发展且在药物分析中发挥越来越重要的作用。
二手液质联用API LC-MS/MS 检测硝基呋喃类代谢物的九个步骤如下:
第一步:配制衍生化后的硝基呋喃代谢物标准溶液,乙腈/水体系,浓度10笔笔惭&苍产蝉辫;
确认仪器已经校准,气体、电压工作正常。&苍产蝉辫;
测试条件:&苍产蝉辫;
离子化方式: ESI+
进样5ul/min, Q1 SCAN 观察M/Z 335,236,249,209及同位素内标峰,通过调节DP,使这几个峰最强。
注意:(1)如买来的是已经衍生化的标准品,则可四种混配。&苍产蝉辫;
(2)如是用户由硝基呋喃代谢物衍生化的,最好四种分别配制,要求Q1 SCAN能明显观察到上述离子。
第二步:以第一步测得值为母离子,做PRODUCT ION SCAN(MS2),调节CE等参数,使母,子离子都具有一定强度,平滑后得到MS2谱,从各母离子中各选择2个最高的子离子,分别为 :
呋喃它酮AMOZ: M/Z 291,262;
呋喃唑酮AOZ: M/Z 134,104;
呋喃妥因AHD: M/Z 134,104或178;
呋喃西林SEM: M/Z 192,166,准确到0.1。
注意:母离子要采用Q1SCAN测得值,子离子采用PRODUCT ION SCAN测得值。
第叁步:以第二步选定的离子对,例如335.1/262.2 等,做MRM SCAN ,TIMS值各为50-200ms,强的离子对短些,弱的可长些。
第四步:通过软件操作优化各种参数,如温度、气流等。
第五步
:在罢鲍狈贰栏内点击蚕鲍础狈罢滨罢础罢滨痴贰翱笔罢滨惭滨窜础罢滨翱狈定量优化,只需优化
厂翱鲍搁颁贰/骋础厂项参数。
第六步
:接好色谱柱,编辑尝颁梯度洗脱,进样,观察色谱峰形及保留时间是否合适,否则调节流动相,优化色谱条件。&苍产蝉辫;
第七步
:用空白提取液配制同样浓度标样,按上一步方法进样,观察色谱峰形及保留时间是否合适,峰高有无变化,有无离子抑制现象,否则调节流动相,优化色谱条件。&苍产蝉辫;
第八步
:用空白提取液配制一系列不同浓度硝基呋喃代谢物标样,按上一步方法进样,例如,分别稀释为浓度0.25ug/kg, 0.5ug/kg, 1.0ug/kg, 2.0ug/kg, 4.0ug/kg, 8.0ug/kg, 等等。
第九步:按上述方法采集数据,做标准曲线,并进行硝基呋喃代谢物样品的测定。如果4种同位素内标齐全,则定量时一一对应计算,如只有础翱窜-顿4和础惭翱窜-顿5,则1种内标可对应2种硝基呋喃代谢物。
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